Maria di Guisa (in inglese, Mary of Guise, in francese, Marie de Guise) (Bar-le-Duc, 22 novembre 1515 – castello di Edimburgo, 10 giugno 1560) membro della potente famiglia dei Guisa, ramo della Casa di Lorena, fu regina consorte di Scozia come sposa di Giacomo V e, alla sua morte, reggente del regno dal 1554 al 1560, per conto della loro figlia Maria Stuarda.
Durante la reggenza, Maria prese nelle proprie mani le redini della politica nazionale, nel maggio del 1553 l'ambasciatore francese Jean Scheyfve udì che la reggenza di Arran stava giungendo al termine e che Maria aveva proposto come suo sostituto il figliastro James Stewart. Infine fu la stessa Maria a divenire reggente dal 12 aprile 1554 e durante la reggenza si consultò sempre con i due potenti fratelli in Francia - il cardinale Carlo di Lorena e Francesco, duca di Guisa, entrambi in posizioni di governo - così che la Scozia e la Francia si presentassero come alleati nel trattare con le altre nazioni. La reggenza di Maria fu comunque minacciata dalla crescente influenza dei protestanti scozzesi segretamente supportati da Elisabetta I d'Inghilterra, e fu proprio in questo periodo che si posero le basi per la futura lotta interna al paese basata sul credo religioso. Quando Maria morì diidropisia le sue spoglie furono riportate in Francia e sepolte nella chiesa del convento di Saint Pierre a Reims, la cui badessa era sua sorella Renata.
In tempi moderni - sia nel film Elizabeth sia nel romanzo di Philippa Gregory L'amante della regina vergine - si suggerisce l'ipotesi che la regina Elisabetta abbia ordinato l'avvelenamento di Maria perché aveva ricevuto, dalla Francia, un abito da sposa sul quale era stato applicato del veleno. Non sussiste tuttavia alcuna prova di ciò, anzi, la morte di Maria di Guisa fu una delle poche morti di regnanti che nel XVI secolo il popolo non attribuì al veleno.
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